Особо опасные инфекции
Тесты для идентификации культуры.
1. Морфология возбудителя.
Грам — . «Стая рыб». Подвижны. Монотрихи.
2. Рост на питательных средах.
1% пептонная вода – голубая пленка.
Щелочной агар – среднии колонии голубоватого цвета.
Среда TBRS – колонии желтого цвета.
3. Изучение антигенных свойств.
4. Сахаролитические свойства.
Лактоза, арабиноза, дульцит –
Глюкоза, сахароза, манит, манноза, мальтоза > к
5. Протеолитические свойства.
Разложение желатина, пептонизация молока +
Разложение мочевины (V. cholerae +, V. eltor — )
6. Проба на оксидазу.
Оксидаза +
7. Чувствительность к фагам.Ускоренные методы
Реакция иммобилизации. На предметное стекло наносят 2 капли
испражнений или материала с поверхности пептонной воды. К 1-ой капле
добавляют одну каплю О-сыворотки (1:100), ко 2-ой – каплю физ раствора.
Каждую каплю эмульгируют пастеровской петлей или пипеткой, накрывают
покровным стеклом и просматривают под микроскопом. При положительном
результате в первой капле прекращается движение вибрионов, во второй
наблюдается движение.Люминисцентно-серологический метод.
Тесты для идентификации культуры.
1. Морфология возбудителя.
Грам — . Капсула. Полиморфны. Биполярность (окраска метиленовым синим).
2. Рост на питательных средах.
МПА – через 48 часов «кружевной платочек».
МПБ – «сталактитовый рост»
Скошенный агар – вязкий серый налет
3. Изучение антигенных свойств.
4. Сахаролитические свойства.
Мальтоза, арабиноза, глюкоза (не всегда), маннит > к
Сахароза, рамноза —
5. Протеолитические свойства.
Разложение желатина, свертывание молока — . H2S +
6. Биологическая проба.
7. Чувствительность к фагам.Дифференциация возбудителей чумы
от возбудителя псевдотуберкулеза.|Признаки |Возбудитель чумы |Возбудитель |
| | |псевдотуберкулеза |
|Подвижность |Неподвижен |Подвижен |
|Рост на голодной |Не растет |Растет |
|среде |Лизируется |Не лизируется |
|Чумной бактериофаг |- |+ |
|Расщепление рамнозы |- |+ |
|Образование мочевины |- |+ |
|Свертывание молока |Медленное |Быстрое |
|Лакмусовое молоко |ощелачивание |ощелачивание |
| |Обладает |Не обладает |
|Фибринолитические |Убивает морских |Морских свинок убивает, |
|св-ва |свинок и крыс |крыс не убивает |
|Патогенность для | | |
|животных | | |Тесты для идентификации культуры.
1. Морфология возбудителя.
Грам — . Не подвижны. Окраска по Романовскому – нежно-фиолетовые
2. Аллергическая проба.
Пробу ставят на 3– 5день заболевания.
а) накожный метод: тулярин (1 мл – 10 млрд. убитых микробных клеток).
Пробу ставят на наружной поверхности плеча. Положительная реакция –
гиперемия и отечность вокруг насечки диаметром 1–2 см через 48–72 часа.б) внутрикожный метод: взвесь убитых бактерий (1 мл – 500 млн. микробных
клеток). Пробу ставят на ладонной поверхности предплечья. Положительная
реакция – отечность и гипермия через 24 – 48 часов.
3. Серологическая диагностика.
Линейная реакция агглютинации: 2 – 3 мл крови из локтевой вены берут в
пробирку. Полученную сыворотку разводят 1:50 до 1:1600. Диагностическим
титром является положительный результат реакции в разведении сыворотки от
1:100 и выше. Антигеном служит туляремийный диагностикум – убитая
формалином взвесь бактерий (1 мл – 25 млрд. микробных тел).
РНГА: сыворотку разводят от 1:100 до 1:10000. Антиген – туляремийный
эритроцитарный диагностикум. Диагностическим титром считают титр 1:100 и
выше.
4. Биологическая проба.
5. Люминисцентно-микроскопический метод.Тесты для идентификации культуры.
1. Морфология возбудителя.
Грам — . Не подвижны. Капсула. В мазке располагаются беспорядочно.
2. Бактериологический метод.
Производят посев крови во флаконы, в которые наливают по 30 – 50 мл
агара. В каждый флакон заливают по 25 – 30 мл простерилизованного
бульона. Эту среду выдерживают в термостате 2 – 3 дня, после чего
добавляют по 5 мл в каждый флакон. При положительном результате на
поверхности появляются колонии – мелкие, бесцветные, выпуклые с
зернистостью.
3. Серологическая диагностика.
Реакция Райта. Берут 1 – 2 мл крови из пальца. Получают сыворотку.
Разводят 1:25 до 1:1600. Диагностическим титром является положительный
результат реакции в разведении сыворотки от 1:100 и выше (при титре 1:400
– реакция резко положительная). Антигеном служит туляремийный
диагностикум – убитая культура бруцелл.
4. Аллергическая проба.
Внутрикожно в ладонную поверхность предплечья вводят 0,1 мл бруцеллина.
Результат реакции учитывают через 24 – 48 часов. Положительная ракция
характеризуется отеком и гиперемией размером 4(6 см.
5. Биологическая проба.
6. Метод иммунофлюоресценции.Тесты для идентификации культуры.
1. Морфология возбудителя.
Грам + . Не подвижны. Капсула. Спора.
2. Рост на питательных средах.
МПА – «голова медузы» или «львиная грива»
МПБ – придонный рост в виде «комка ваты»
Желатин – «перевернутая елочка»
3. Изучение антигенных свойств.
4. Сахаролитические свойства.
Глюкоза, лактоза, мальтоза, левулеза > к
5. Протеолитические свойства.
Разложение желатина, пептонизация молока +
Медленное свертывание молока. H2S + . NH3 + .
6. Гемолитические свойства.
Не вызывает гемолиз, в отличии от антракоида.
7. Чувствительность к фагам.
8. Биологическая проба.
9. «Жемчужное ожерелье»:
К бульону Хоттингера прибавляют 30% инактивированной сыворотки и
пенициллин из расчета 0,5 ЕД на 1 мл бульона. 3 часа в термостате. Делают
мазок. Фиксируют жидкостью Карнуа (этиловый спирт, хлороформ и ледяная
уксусная кислота). Окрашивают метиленовым синим и микроскопируют.
Результат действия пенициллина – цепи шаров, на поминающих «жемчужное
ожерелье».
10. Аллергическая проба.
Внутрикожно на внутренней поверхности предплечья вводят антраксин.
Реакцию учитывают через 24 – 48 часов. Положительная реакция проявляется
с первых дне заболевания.
10. Реакция Асколи.
Приготовление антигена: исследуемый материал измельчают, заливают 25 – 50
кратным объемом физ раствора и кипятят. Полученный экстракт фильтруют.
Для реакции используют преципитирующую сибиреязвенную сыворотку и для
контроля сибиреязвенный антиген.
Постановка реакции:
1-ая пробирка – преципитирующая сыворотка + исследуемый термоэкстракт;
2-ая пробрка – преципитирующая сыворотка + стандартный сибереязвенный
антиген (контроль);
3-я пробирка – преципитирующая сыворотка + термоэкстракт из шерсти
здорового живтного (контроль).
При положителной реакции первых 2 пробирках образуется преципитационное
кольцо, а в 3 – кольцо отсутствует.
